氣相色譜分析、分離的科學方法，被廣泛應用于人類生產(chǎn)生活的方方面面。GC2030Classic氣相色譜儀是泰特儀器氣相色譜儀中的實用型號，適用于對混合氣體中的各種成分進行定性和定量分析。以下由泰特儀器技術人員主要介紹毛細管氣相色譜法測定牛奶中的甜蜜素。
甜蜜素（環(huán)己基氨基磺酸鈉）是人工合成的甜味劑，經(jīng)研究結(jié)果表明甜蜜素有致癌的可能性，所以美國聯(lián)邦法律禁止甜蜜素用作食品添加劑。
在GB2760—1996《食品添加劑使用衛(wèi)生標準》中對甜蜜素的添加量作了明確的規(guī)定，乳飲料及蛋白飲料中添加的最高限量為0.65 g∕kg。食品中甜蜜素的測定標準是GB∕T5009.97-2003，該標準中測定甜蜜素的方法有氣相色譜法（采用填充柱）、比色法和薄層層析法。
牛奶中的蛋白質(zhì)有醇蛋白、乳白蛋白和乳球蛋白，這3種蛋白質(zhì)生理價值高、消化吸收好，是優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)。牛奶因營養(yǎng)全面，而成為人們生活中的必需品。因此實時、快速、準確地檢測牛奶制品中的添加成分和物質(zhì)含量是提高乳制品質(zhì)量的首要條件。在檢測食品和飲料中的甜蜜素時GC∕FID已被廣泛應用，但由于在處理乳制品（高糖、高脂、高蛋白）的酯化過程中，易發(fā)生乳化現(xiàn)象，導致回收率偏低。因此本文試圖通過對沉降劑用量、酯化時間的優(yōu)化，減少酯化過程中的乳化現(xiàn)象，提高樣品的回收率，降低檢出限。
1 儀器與材料
1.1 檢測條件
進樣體積：1 μL；毛細管柱；進樣口溫度：160.0℃；檢測器：FID；柱溫75℃；分流比：10∶1；載氣：氮氣；線速度：23.6 cm∕s；柱流量：0.8 mL∕min；H2流量：40 mL∕min；空氣流量：400 mL∕min。
1.2 實驗儀器
氣相色譜；SPH-300氫氣發(fā)生器、SPH-3空氣發(fā)生器（上海儀電分析儀器有限公司）；AL204電子天平（上海有限公司）；AS20500BDJ超聲波清洗器；M37610-33CN渦旋器（Thermo Scientific）；LD4-2A離心機（北京醫(yī)用離心機廠）。
1.3 化學試劑
甜蜜素標準品（Supelco公司，色譜純）；沉降劑（同體積的100 g∕L乙酸鋅溶液+32 g∕L亞鐵氰化鉀），氯化鈉、正己烷、硫酸、亞硝酸鈉、無水硫酸鈉等試劑均為分析純。市售大理某品牌牛奶（出廠日期：2012年5月12日）。
2 試驗方法
2.1 蛋白質(zhì)沉降
精密稱取充分震蕩混合均勻后的試樣20.0 g于100 mL具塞比色管中，加入10 mL蒸餾水，再加入5 mL沉降劑（卡瑞試劑），蒸餾水定容至刻度，充分混勻，靜置30 min待蛋白質(zhì)沉降完全后，過濾，收集續(xù)濾液備用。
2.2 酯化反應
待上述續(xù)濾液靜置澄清后，精密移取20 mL于100 mL具塞比色管中，加入10 mL蒸餾水，加入50 g∕L亞硝酸鈉溶液和100 g∕L硫酸各5 mL，充分混勻，放入冰箱，靜置30 min，然后準確加入10 mL正己烷和5 g氯化鈉，漩渦器上充分震蕩1 min，靜置，待有機相與水相分層后，離心分離，有機層經(jīng)無水硫酸鈉脫水，取適量于進樣瓶中，進樣分析，以峰面積外標法定量。
2.3 對照品溶液制備
精密稱取甜蜜素標準品50 mg于50 mL容量瓶中，加蒸餾水定容，搖勻，即得1.0 mg∕mL的標準溶液。
牛奶中蛋白質(zhì)的存在會加劇酯化過程中的乳化現(xiàn)象，使有機相與水相不易分層，而卡瑞是一種廣泛使用的沉降劑，能很好的消除酯化過程中的乳化現(xiàn)象，且卡瑞試劑不出峰，故不影響分析測定。高溫會導致酯化反應過程中生成的亞硝酸分解，不利于酯化反應的進行，故酯化反應時必須放置在0℃冰箱中。本文通過研究用毛細管氣相色譜法測定牛奶中甜蜜素含量的分析方法，通過對沉降劑用量、酯化時間等條件的優(yōu)化，降低方法的檢出限。利用甜蜜素（環(huán)己基氨基磺酸鈉）在硫酸介質(zhì)中與亞硝酸鈉反應后生成環(huán)己醇亞硝酸酯，用正己烷萃取，并用氣相色譜檢測環(huán)己醇亞硝酸酯的含量。甜蜜素的線性范圍為0.05～0.4 mg∕mL，方法檢出限為2 μg，加標回收率在99.4%～102.5%之間，RSD為1.4%。該方法簡便、快捷、準確度高、重現(xiàn)性好，方法檢出限低，優(yōu)于GB∕T5009.97-2003法的4 μg檢出限。
